考马斯亮蓝测蛋白
1.捣碎洋葱,但不能加去污剂,加去污剂会影响比色结果。过滤假设你没有标准曲线2.取一定量这个其实可多可少,主要是每次分量一样就行考马斯亮蓝G250别用成R250!,与已知浓度浓度要小,大了就不是线性关系了的蛋白溶液混合,用紫外分光光度计测595纳米处的光吸收,绘制标准曲。
用考马斯亮蓝法测绿豆芽中蛋白质的含量为什么那么低
考马斯亮蓝法只能测可溶性蛋白,而绿豆芽中的蛋白可能主要是非水溶性的。考马斯亮蓝法是一种常用的蛋白质定量测定方法,它基于考马斯亮蓝G-250染料与蛋白质结合后颜色变化的原理。然而,这种方法有一个局限性,那就是它只能测量可溶性蛋白,而对于非水溶性的蛋白质则无法准确。
关于考马斯亮蓝G250法测定蛋白质的含量问题
1要减去空白对照。2注意公式里的单位和稀释倍数别搞错。3降低稀释倍数,大约比现在浓38倍,使吸光度在0.20.6范围内,以减少误差。
蛋白质聚合物与考马斯亮蓝反应吗考马斯亮蓝测蛋白质含量的原理
考马斯亮蓝法是一种常用的蛋白质含量测定方法。这种方法是利用蛋白质与考马斯亮蓝CoomassieBrilliantBlue发生复合反应,从而在一定波长下产生吸收峰。根据吸收峰的强度,可以计算出样品中蛋白质的含量。考马斯亮蓝分子中含有两个羧基,能够与蛋白质分子中的氨基和羧基发生。
考马斯亮蓝测蛋白质的问题为什么测的蛋白质的吸光度比空白低
考马斯亮蓝测定蛋白质吸光度低于空白可能由以下原因造成:样品本身含有非蛋白杂质:这些杂质可能会干扰染料与蛋白质的结合,从而降低检测结果的准确性。染液与蛋白质结合不完全:如果染液与蛋白质结合不完全,会导致检测结果偏低。洗涤不充分:在测定过程中,如果洗涤步骤不够。
考马斯亮蓝G250法测蛋白质含量比其他方法有什么优点
考马斯亮蓝G250法测蛋白质含量的优点如下:反应速度快:蛋白质与考马斯亮蓝G-250结合在2min左右的时间内达到平衡,完成反应十分迅速。稳定性好:其结合物在室温下1h内保持稳定。操作简便:该法试剂配制简单,操作简便快捷,反应非常灵敏,灵敏度比Lowry法还高4倍,可测定微克。
用考马斯亮蓝G250法测定蛋白质的含量时应注意哪些问题
1.大量的去污剂如TritonX100、SDS等严重干扰测定。2.蛋白质与考马斯亮蓝G250结合的反应十分迅速,在2min左右反应达到平衡;其结合物在室温下1h内保持稳定。因此测定时,不可放置太长时间,否则将使测定结果偏低。
考马斯亮蓝G250法测定蛋白质含量时如何避免测定中出现误差避免
考马斯亮蓝G250法测定蛋白质含量时,可以通过以下方法避免测定中出现误差,避免样品的OD值低于空白对照的情况发生:提前预热分光光度计、正确保存考马斯亮蓝溶液、注意去污剂的影响、控制反应时间和温度。提前预热分光光度计测定OD值前,将分光光度计提前预热至少30分钟。
考马斯亮蓝测定可溶性蛋白质样品提取后是否要定容是先离心再定容
是,先离心再定容考马斯亮蓝测定可溶性蛋白质样品提取后需要定容,并且应该先离心再定容。这是因为定容是为了确定溶液的最终体积,以便计算蛋白质的浓度。如果在离心之前定容,那么在离心过程中可能会有液体溅出或者残留,导致体积发生变化,影响结果的准确性。因此,正确的步骤。
用考马斯亮蓝G250法测定蛋白质的含量时应注意哪些问题
1.大量的去污剂如TritonX100、SDS等严重干扰测定。2.蛋白质与考马斯亮蓝G250结合的反应十分迅速,在2min左右反应达到平衡;其结合物在室温下1h内保持稳定。因此测定时,不可放置太长时间,否则将使测定结果偏低。