SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白质的实验中当分离胶加完之后

有谁知道做WB的实验流程求提供
　　该法能用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分辨出与专一抗血清结合的专一性蛋白质。将聚丙烯酰胺凝胶上分辨出的蛋白质转移到硝酸纤维素膜上并与第一抗体共孵。第一抗体专一地与待分离蛋自质的抗原决定簇结合，然后用另一种蛋自质，如135I蛋白A或辣根过氧化物酶连接的山羊抗IgG检测已。

WesternBlot实验步骤
　　凝胶网状结构的孔径越小，分子量大的蛋白迁移速率就会更慢。SDS-PAGE凝胶通常分为两部分：浓缩胶和分离胶，浓缩胶的作用是将加样孔中的。同时还能断开蛋白质分子的氢键，DTT可以断开蛋白质中的二硫键。蛋白转印：将蛋白质从电泳后的聚丙烯酰胺凝胶转印至对蛋白质有很强亲和。

如何测未知蛋白质功能
　　氨基酸组成计算器http：//www.***.cn/tools/mwcal/一般的方法：SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的分子量[原理]十二烷基硫酸钠Sodiumdodecylsulfate，简称SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的分子量，是六十年代末Weber和Osborn在Shapiro等人在实验基础上发展起来。

WB实验是检测什么怎么做
　　WB实验是通过聚丙烯酰胺凝胶电泳PAGE将混合蛋白质样品分离后，利用特殊虹吸或电场装置印迹至固相介质例如PVDF膜上，再以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原。与相对应的第一抗体特异性结合，之后再与酶或同位素标记的第二抗体相结合，最终通过底物显色或放射自显影来检。

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　　配胶这些小孔的孔径随“双丙烯酰胺～丙烯酰胺”比率的增加而变小，比率接近1：20时孔径达到最小值。SDS聚丙烯酰胺凝胶大多按“双丙烯酰胺～丙烯酰胺”为1：29配制，试验表明它能分离大小相差只有3%的蛋白质。分离胶及浓缩胶均可事先配好除AP及TEMED外，过滤后作为储。